伯乐垂直电泳 MP4维护保养及biorad电泳维修故障排除
作者:bioservicer           时间:2020-02-14 18:02:49

一 垂直电泳维护保养方法

1:Mini-PROTEAN Tetra电泳槽、上盖每次用完后用蒸馏水或去离子水彻底清洗。

2:Mini-PROTEAN Tetra 铂金电极芯、制胶架、制胶框每次用完后用用蒸馏水或去离子水彻底清洗。

3Mini-PROTEAN Tetra  玻璃板和梳子   用实验室洗涤剂清洗,然后用蒸馏水彻底冲洗。隔条玻璃板长时间浸没会损害粘合剂的完整性,浸没在chromic-sulfuric acid清洗液中的时间限制在2-3小时,为了保持粘接剂的使用寿命,避免在Bio-Rad清洁浓缩液(目录#161-0722)或其他强碱性洗涤剂制成的清洗液中浸泡(>5天)。


二故障解决方案 biorad伯乐垂直电泳维修方法指南

1:问题:笑脸条带  胶的两端向上弯曲

 原因: 1运行时,胶的中心区域比其它区域热   2 电源设置参数过高

 解决方案:缓冲液混合不良,重新制作缓冲液确保充分混合,特别是5倍稀释或10倍稀释时。减小电源设定,从200v减到150v,或添加         电极芯玻璃板中间的缓冲液,填到短板顶部1厘米内。

2:问题:蛋白条带拖尾

 原因: 1样品浓度过高  2样品析出

 解决方案:选择性地稀释样品,减少样品中的主要蛋白质,或减小25%电压去抑制拖尾现象。离心样品前添加SDS样品缓冲液,SDS与蛋         白质的比例应足以覆盖每种蛋白质分子与SDS,一般为1.4:1。

3:问题:条带扩散

   原因:1样品在打开电源之前已经扩散 2样品离子强度低于胶的离子强度

   解决方案:1缩短样品配置与打开电源之间的时间  2 在配置胶过程中用和样品相同的缓冲液

4:问题:条带扭曲

   原因:1孔的周围聚合物比较少  2盐在样品中分布不均匀

   解决方案:1除去积层凝胶溶液完全在凝胶之前增加过硫酸铵和TEMED浓度降低25%,用于叠凝胶或低%T,留下APS相同且双倍于            TEMED集中   2通过透析除去盐分,脱盐,柱,微生物SPIN™列等降低聚合速率。非常小心地覆盖凝胶

5问题:胶的底部泳道之间比较窄

 原因:样品离子强度高于凝胶  

 解决方案:脱盐样品及其邻近样品

6问题:泳道运行的太长

 原因:电泳缓冲液太浓,样品中的盐过量

 解决方案:检查缓冲液程序,有必要的话稀释缓冲液 脱盐样品

7问题:跑得太快

 原因:1运行或电泳槽缓冲液太稀  2电压过高

 解决方案:1检查缓冲液程序,有必要的话稀释缓冲液   2降低电压25-58%

8问题:观察到的二重态 二聚体

 原因:蛋白的一部分在运行过程中被氧化  

 解决方案:制备新鲜样品缓冲液,如果超过30天,增加缓冲液浓度。

9问题:缺少一个泳道,而且有一个比较大的泳道

 原因:蛋白迁移   蛋白降解

 解决方案:增加分解凝胶的%T使用蛋白酶抑制剂,例如,PMSF等。

10问题: 上缓冲液时,漏液

 原因:电极中间加入缓冲液过多  装配不良

 解决方案:请确保短板位于垫圈上的缺口,而不是顶部,确保U形电极芯垫圈清洁,无切口,用缓冲器润滑。加缓冲液确保加到隔条玻         璃板的下端。

11问题: 制胶过程漏液

原因: 玻璃板有破损,玻璃板安装没有水平,胶垫老化

解决方案:确保玻璃板无破损,确保玻璃板安装整齐,确保胶垫无缺损或老化。

12问题: 制胶过程漏液

原因:催化剂形成不正确  单基体溶液未排出。氧化抑制聚合

解决方案:1 准备新鲜的催化剂溶液,或增加催化剂  凝胶催化剂浓度至0.06%APS和0.12% TEMED  2 在注入堆积凝胶之前立即除去单基体溶液

13问题:梳子后面有多余的丙烯酰胺

 原因:催化剂形成不正确  单基体溶液未排出。  

解决方案:准备新鲜的催化剂溶液,或增加催化剂  凝胶催化剂浓度至0.06%APS和0.12% TEMED

14问题:制胶架压力凸轮处不好关闭,或者关闭时候有噪音

 原因:制胶器压力凸轮上或连接处有脏东西,或者粉末。  

解决方案:每次使用前先冲洗或擦掉粉末

作者:天津伯乐biorad仪器售后维修中心

                                                                                                                                                                                                              2020.2.14


                                                                                                                                                                                                           






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